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小鼠胚胎成骨細胞MC3T3-E1的儲存要注意的事項

從克隆的但是表型各異的MC3T3-E1細胞系中分離出一系列亞克隆。從含抗壞血酸培養基生長的成骨細胞中選擇高或低成骨細胞分化、礦化的亞克隆。MC3T3亞克隆4（ATCCCRL-2593）和MC3T3亞克隆14（ATCCCRL-2594）在抗壞血酸和3到4mM無機磷酸鹽中生長表現出高水平的成骨細胞分化。它們10天后形成一個礦化良好的細胞外基質（ECM）。MC3T3亞克隆24（ATCCCRL-2595)和MC3T3亞克隆30(ATCCCRL-2596)在抗壞血酸中生長表現出很差的成...

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小鼠成纖維細胞L929傳代流程的注意事項

小鼠成纖維細胞L929分離自小鼠皮膚組織的貼壁細胞，成纖維細胞是疏松結締組織的主要細胞成分，由胚胎時期的間充質細胞(mesenchymalcell)分化而來。功能活躍的細胞稱為成纖維細胞。成纖維細胞較大，輪廓清楚，多為突起的紡錘形或星形的扁平狀結構，其細胞核呈規則的卵圓形，核仁大而明顯。纖維細胞（fibrocyte），結締組織中數目最多的細胞，相對靜止的細胞稱纖維細胞。成纖維細胞數目最多，胞體大，為多突的紡錘形或星形的扁平細胞，細胞核呈規則的卵圓形，細胞輪廓不清，具有突起。其...

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介紹DC細胞的兩種來源途徑

樹突狀細胞（Dendriticcells,DC）是機體功能較強的專職抗原遞呈細胞，它能高效地攝取、加工處理和遞呈抗原，未成熟DC具有較強的遷移能力，成熟DC能有效激活初始型T細胞，處于啟動、調控、并維持免疫應答的中心環節。DC的來源有兩條途徑：①髓樣干細胞在GM-CSF的刺激下分化為DC，稱為髓樣DC，也稱DCl，與單核細胞和粒細胞有共同的前體細胞；包括朗格漢斯細胞，間皮（或真皮）DCs以及單核細胞衍生的DCs等，②來源于淋巴樣干細胞，稱為淋巴樣DC或漿細胞樣DC，即DC2，...

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骨髓間充質干細胞常用的分離方法有哪些

骨髓間充質干細胞是骨髓基質干細胞，是人們在哺乳動物的骨髓基質中發現的一種具有分化形成骨、軟骨、脂肪、神經及成肌細胞的多種分化潛能的細胞亞群。它們對骨髓中的造血干細胞（HSC）不僅有機械支持作用，還能分泌多種生長因子（如IL-6，IL-11，LIF，M-CSF及SCF等）來支持造血。目前常用的分離MSC的方法主要有全骨髓法和密度梯度離心法，全骨髓法即根據干細胞在低血清培養基中有貼壁優勢特性，定期換液除去不貼壁細胞，從而達到純化及擴增MSC的目的。密度梯度離心法即根據骨髓中各細胞...

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人臍靜脈內皮細胞系HUVEC的使用注意事項

血管內皮細胞對維持血管動態平衡起著重要作用。它們合成、分泌凝血和纖溶系統的激活因子和抑制因子、影響血小板粘附和聚集的調節因子。內皮細胞還釋放控制細胞增殖和調節血管壁緊張度的分子。這些過程都可以用培養的細胞進行體外研究，人臍靜脈和動脈內皮細胞是這類研究中常用的細胞類型。除了普通的內皮細胞特征例如“鵝卵石狀”，VIII因子陽性著色，能攝取乙酰基化低密度脂蛋白，人臍血管內皮細CD31染色陽性。用IL-1或TNF-α預先處理過的細胞也能選擇性地表達E-selectin和VCAM。人臍...

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大鼠心肌細胞的特點及運輸保存

心肌的工作細胞包括心房肌和心室肌。心肌細胞為短柱狀，一般只有一個細胞核，心肌細胞之間有閏盤結構。該處細胞膜凹凸相嵌，并特殊分化形成橋粒，彼此緊密連接，但心肌細胞之間并無原生質的連續。心肌細胞的細胞核多位于細胞中部，形狀似橢圓或似長方形，其長軸與肌原纖維的方向一致。肌原纖維繞核而行，核的兩端富有肌漿，其中含有豐富的糖原顆粒和線粒體，以適應心肌持續性節律收縮活動的需要。大鼠心肌細胞的細胞特性：1)組織來源于實驗動物的正常心臟組織。2)細胞鑒定：肌球蛋白重鏈(MHC)免疫熒光染色為...

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Ⅱ型肺泡細胞在調節肺免疫防御中起重要作用

Ⅱ型肺泡細胞指的是大肺泡細胞，又稱分泌細胞。分泌表面活性物質(二棕櫚酰卵磷脂)，以降低肺泡表面張力。肺巨噬細胞，來自于血液單核細胞。吞噬了較多塵粒的被稱為塵細胞，而心衰細胞則是心力衰竭患者肺內出現的吞噬了血紅蛋白分解的含鐵血黃素的巨噬細胞。肺泡與肺部毛細血管緊密相連。兩者的膜大部分融合，有助于氣體的快速擴散。而肺泡表面液體層，Ⅰ型肺泡細胞與基膜，薄層結締組織，毛細血管基膜與內皮組成了所謂的氣一血屏障。細胞較小，成立方形或圓形，散落在I型肺泡細胞之間。核圓形，胞質著色淺，呈泡沫...

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介紹小鼠海馬神經元細胞HT22培養的注意事項

海馬椎體神經元是海馬區的主要成分，主要功能是參與近期記憶、情緒及內臟功能調節、是老年性癡呆、癲癇等疾病的主要病灶之一。小鼠海馬神經元細胞HT22培養是研究神經細胞生物學特性和外源干擾因素作用(細胞因子)的有效細胞模型，其在神經生物學，發育生物學體外實驗研究中已被廣泛應用。一、傳代培養傳代前準備--胰蛋白酶消化--吹打分散細胞--分裝稀釋細胞--繼續培養1)將培養瓶內舊的培養液棄掉，然后用D-Hanks液洗兩次，(一定要洗干凈，以免影響胰酶的消化作用)。2)加入0.25%胰酶-...

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